A kompozíció a tápközegek - studopediya
Meghatározása az összetétele a táptalaj magában, hogy ebben az esetben figyelembe kell venni, és olyan tényezőket, mint a biofizikai pH, a hőmérséklet, a kínálat és eltávolítása a molekuláris oxigén, kritikusak a növekedés bármely baktérium tenyészet. Hőmérséklet, levegőztetést és a nyomást határozza meg termesztési feltételek, redox potenciál függ a készítmény a növekedési közeg és a tenyésztési körülmények. Monitoring redox potenciál különösen fontos a termesztés obligát anaerob baktériumok.
Zselatin - savas nitrogéntartalmú által előállított termék az emésztést a csont és porc. Szilárd táptalajt olyan széles körben használják, mint gél okmánylap bevezetett gyakorlatban mikrobiológiai SN Vinogradskii. A mikroorganizmusok növekedésének a szerves formái nitrogén gyakran használják a hús-pepton táptalajt: hús-pepton húsleves, hús-hús-pepton-agar és zselatin.
Hús-pepton (BCH). A készítmény a hús-pepton média használt húsleves, amely a következőképpen állítjuk elő: 500 g finomra vágott a friss hús csont nélkül, zsír és ín öntjük egy zománcozott serpenyőben 1 liter csapvizet melegítjük 50 ° C-on, majd hagyjuk, hogy átjárja 12 órán át szobahőmérsékleten, vagy 1 órán át 50-55 ° C-on Hús préselt, az extraktumot átszűrtük egy gézt egy réteg vatta, 30 percig forraljuk a koagulációs kolloid fehérjék és szűrjük kétszer (először egy pamut géz, a második - keresztül papírszűrő). Szűrés feltöltjük vízzel 1 liter, öntjük a lombikba, lezárjuk vattadugóval és sterilizáljuk 120 ° C-on 20 percig (-lombikot, lezárt cső tetején sapkák a papír). Füldugó kell lennie kompakt, mivel ezek szűrő megakadályozza behatolását baktériumok a levegő után, a sterilizálás. A húsleves használható bármikor a készítmény a megfelelő média. Ha készek harcolni, a elősterilizálása szükségtelen. Gyakran előfordul, hogy az in vitro hús infúziós főtt együtt húst, majd a húst leszívatjuk. Bouillon lesz jó minőségű. Amennyiben az a kívánatos, hogy egy nagyon nagy húsleves tápanyag infúzió során húst vizet adunk és megsavanyítjuk enyhén pepszin húslevest sósavval. A pepszin tovább hidrolizáljuk fehérjeszerű hús vegyületet, és az összeget az emészthető tápanyagok baktériumok növekedésével. Hús helyettesítheti húskivonat, vesz neki, hogy 5 g per 1 liter közegben.
A készítmény a hús-pepton húsleves 1 liter táplevest adunk hozzá 5,10 g pepton (pepton - első fehérje hidrolízis terméket egy nagy molekulatömegű), hogy növelje a kalóriatartalma a közeg, és 5 g nátrium-kloridot ahhoz, hogy hozzon létre egy ozmotikus aktivitása. A közeget melegítjük oldódásig peptont, folyamatos keverés közben. Ezután létrehoz egy semleges vagy enyhén lúgos közegben, hullámzó 20% NagCOa oldatot (kékülési nedves lakmuszpapír piros, fenolftalein egy még azt mutatja, alkáli - hozzátéve, hogy a közeg egy porcelán tálba rózsaszín szín nem észlelhető). Kényelmes használat bromtimolblau mutató. 1-2 csepp így egy üvegbottal egy porcelán tálba és a húslevest hozzáadott csepp. A semleges közegben bromtimolblau palackot zöld savas - sárga, alkáli - kék. Miután a létesítmény a reakcióelegyet forraljuk ismét 5-10 percig, és fehérjék, aludttej változtatásával a reakcióelegyet szűrőpapíron átszűrjük tisztázása nélkül a tápoldat vagy pontosította fehérje. Átlátszó hús-pepton húsleves fiolákba töltjük szét, vattával lezárjuk, dugók és sterilizáljuk 120 ° C-on 20 percig.
A hús-pepton-agar (MPA). Ahhoz, hogy 1 liter hús-pepton táplevest adunk hozzá 15-20 g apróra vágott agar. A közeget melegítjük, amíg az oldódás az agar (olvadási hőmérséklet 100 ° C, dermedéspont a - 40 ° C-on) van beállítva enyhén lúgos közeg 20% Na2COa oldatot a tölcséren keresztül, és öntjük ampullák (10 ml de öntvények csészék - agar oszlop, és a 5 ml lesarkított, ferde agar). Spill agar figyelemmel kell kísérni, majd a csőbe élek száraz, különben a parafa botot az üveghez. A kémcsöveket a közepes sterilizáljuk autoklávban 120 ° C-on 20 percig.
Hús-pepton-zselatin (NRM). Egy 1 l hús pepton húsleves zavarja 100-150 g zselatin. Az olvadási hőmérséklet függ a százalékos tartalma a közeg. 10% -os zselatin-on olvad 24 ° C-on, 15% - 25 ° C-on A nyári időszakban a közeget úgy állítottuk elő, 15% zselatint. Feloldódása után zselatin enyhe melegítéssel beállított táptalajban enyhén lúgos (például a BCH-t és IPA), 5 percig forraljuk, majd lehűtjük a le- 40-50 ° C-on Ugyanakkor a tojásfehérjét felvert egy kis vízzel, öntsük a lehűtött zselatinos tápközegben, jól összerázzuk, és a fűtött újra. Közepes felvitele után, fehérje átlátszóvá válik. Ezt átszűrjük egy fűtött tölcsér szétosztottuk csövek és sterilizáljuk áramló gőzkazán Koch, felmelegedés közegben 30 percen át 24 órán keresztül 3-szor.
Burgonya-agar. 200 g tisztított vízben, és mossuk burgonyát vágjuk szeletekre, 1 liter csapvizet, 30 percig forraljuk. Fermentlevet vattán átszűrjük és beállítani, hogy az eredeti térfogatot. A kapott folyadékot adunk 2% agar, addig melegítjük, amíg a oldódást, és a kiolvasztott semleges közegben (pH = 7,0). A táptalajt sterilezzük 1 atm 20 percig.
Wort agar. Előállítása cefre hozzáadásához 2,5-3% agar, addig melegítjük, amíg az olvadási, vattán szűrjük, sterilizáljuk ugyanolyan módon, mint a sör.
Lefölözött tej. használja lefölözött tej előállítására táptalaj, az úgynevezett sovány (zsír tej negatívan befolyásolja a növekedést bizonyos mikroorganizmusok). Ezzel elválasztásával kapjuk a tej, melegítjük 34 ° C-on Fat lehet távolítani, és megvédeni a tej. Sterilizálása tejet kell venni, hogy ez nem tud ellenállni sokáig az autoklávban, így például a laktóz (tejcukor), tej által tartalmazott, akkor caramelize. Lefölözött tej szétosztjuk steril kémcsövekbe, és tartjuk 115 ° C-on (nyomás 0,5 atm) 15 percig. Sterilizálás előtt savasság sovány tej nem haladhatja meg a 22 ° Turner, különben a tej majd megfagy. Sterilizálás után tartottuk három napig inkubátorban tartottuk 30 ° C-on annak érdekében, hogy kiváltó fejlődésének spóraképző és egyéb hőálló formák. 3 nap után az egyes csövek tejjel böngészés és csövek, amelyek úgy fejlődtek ki organizmusok eldobjuk. Amikor autoklávozás látszólag néha eredményeként a tej Browning karamellizációját laktóz és kazein peptonizáció. Huzamosabb ideig tartó sterilizálási a cső alján csapadékot kazein, amely lehet részlegesen peptonizirovatsya. A túlhevült pirított tej, mint egy közepes nem lehet használni.