Tuberkulózis-örökké - előállítására kenetek mikroszkópos vizsgálat
Előállítása kenetek mikroszkópos vizsgálat egy nagyon fontos eljárás, nagymértékben meghatározza a siker a tanulmány. Meg kell jegyezni, hogy ez az egyik legveszélyesebb eljárásokat. Tuberkulózis terjed a levegőben cseppek révén apró cseppeket körülbelül 5 um nagyságú, amely a kórokozó, amely, ha a tüdőbe kell belélegezni elérheti az alveolusok és rendezni benne, amely egy hangsúly a fertőzés. A laborban erőfeszítéseket kell céloznia, annak érdekében, hogy elkerüljék vagy minimálisra csökkentsék a fertőzés kockázatát kezelése során, amely alatt ott van a legnagyobb veszélye diszperziós potenciálisan fertőző aeroszol. A fő forrásai kialakulását az ilyen aeroszolok manipulált laboratóriumokban társított előállítására kenetek mikroszkópiai:
- nyitás az anyag konténerek; ez a manipuláció különösen veszélyes, ha a külső fal a tartály-nyak és a belső fedél felületi részecskéket megszárítjuk köpet vagy közvetlenül megnyitása előtt a tartály vetettük alá rázatás közben;
- előállítunk egy kenet által letétbe anyagot tárgylemezre és annak eloszlása a felület felett az üveg;
- éget-bakteriológiai hurkokat alkalmazunk továbbítjuk az anyagot az üvegre. Elvégzése során ezeket a manipulációkat legyen különösen óvatos.
Kenetek mikroszkópos vizsgálat céljára állítjuk elő natív kezeletlen köpet. Ehhez, a köpet öntjük Petri-csészébe, amely ültetett alján a fekete papírt. Közel a csészét elhelyezett két tiszta (korábban használt) és a pre-jelölt tárgya ablak. Két boncoló tűk, bakteriológiai hurok, vagy nagyon hegyes fa pálca (minden új minta köpet) 5-6 választjuk legsűrűbb kockacukrot gennyes köpet, vittük át üveg, bevonjuk egy második üveg, és nyomja le finoman, nyomja az üveg különböző irányokba, eldörzsöljük, így egyenletes, vékony rétegben. A kenet kell elfoglalni 2 / z-3L üveg.
Előkészítése során kenetet kell, hogy legyenek óvatosak, hogy elkerüljék a fröcskölés és engedje anyag az üveg szélét.
Főtt tamponokat helyeztük 15-30 percig szűrőpapírra száradni szobahőmérsékleten. Mivel ez nem mindig lehetséges, hogy elkerüljék anyag széleit az üveg, a papír, amelyre lefektetett száraz törlőt kell tekinteni szennyezett. Szárított üveg csipesz vagy fogó vesz a végén, amelyen a jelölést alkalmazzák, és végezzük 3-szor egy láng gázégő vagy alkohollal lámpa (összes tartózkodási idő a láng kenet nem haladhatja meg 3-5 másodpercig), majd helyezzük egy sima papírt vagy speciális tálca .
A nagyobb biztonság érdekében a köpet kenetek lehet a kezelés után visszamaradt anyag.
Keneteket a folyékony kórbonctani anyag (bronchusmosó, bronchiális mosófolyadékot, vagy a gyomor, a vizelet, punctata zárt üreggel, és más kiválasztási termékek visszatartását.) Állítjuk elő a pellet után kapott anyagot kezeléssel savval vagy lúggal, majd mosás vagy semlegesítés és centrifugálás. Szárított és fix festett keneteken. Amikor kiválasztunk egy színt veszi figyelembe a módszer mikroszkópos amelyek révén lesz direkt mikroszkópos vizsgálat: normál fény (olaj immerziós) vagy lumineszcens (fluoreszcens mikroszkóp) mikroszkóp alatt.
Leggyakrabban használt és gyakori módszer a színezés kimutatására saválló bacillusok egy olyan módszer, Ziehl-Nielsen. Egyidejű hőnek és erős maratószer fenolt (karbolsavat), amely előkészíti az alapvető színezék fukszin, anilin festék penetráció megkönnyíti egy mikrobiális sejt, és különösen annak sejtfal szerkezet, amely a lipidek és a mikolsavak. Rendes anilin festékek nem érzékeli micobaktériumok, és az utóbbi nem festett. Későbbi deszaturációs kenet a 29% -os kénsav oldat vagy alkohol 3% -os sósav oldattal vezet elszíneződése saválló szerkezetek. Csak mycobacteria, akik kifejezték sav- és az alkohol, szilárdan tartsa a festéket és piros színű. Az elszíneződött elemek kenet dokrashivayut metilénkék. Mycobacteriumok találhatók a termék formájában vékony, egyenes vagy enyhén ívelt élénkpiros pálca, néha ferde formájában római szám V, Part halmok vagy kisebb csoportokban. Gyakran előfordul, hogy a test rúd vagy azoktól elválasztva szórványos sötétebb szemek, illetve klaszterek (szemcsés formában).
Amikor kenet mikroszkópos kell tekinteni polimorfizmus Mycobacterium tuberculosis, különösen a vizsgálati anyag kapott betegek tuberkulózis elleni küzdelem. Annak a ténynek köszönhetően, hogy a széles körben elterjedt a kemoterápia megváltoztatja a morfológiája mikobaktériumok, bizonyos esetekben a vizsgálati gyógyszerek lehet kimutatni, és elágazó formái egyenetlen szélesség és blednookrashennye coli és mikobaktériumok fragmentumok, és a sav-rezisztens egyes szemcsék vagy klaszterek.
Továbbá, a kenetek a vizeletüledék, gyomormosás és más anyag mellett a Mycobacterium tuberculosis lehet kimutatni és sav szaprofitákkal, különösen a vizeletben - Mycobacterium spermiumok, amelyek könnyen összetéveszthető a Mycobacterium tuberculosis. Kétség esetén, akkor ajánlott Pap hosszú ideig (45-60 perc) elszíneződik sósavban zhavelovoy alkohol vagy víz. Ezzel a módszerrel a fehérítő szaprofiták elveszítik a szín és vasalt formájában rudak kék (így a kenetben fehérítés után kontrasztfestést metilénkék).
Helyes készítmények mikroszkópos felelős eljárást igényel nagy ügyességet és sok tapasztalat microscopist, hiszen alapján mikroszkópos diagnosztizálnak, meghatározott kezelési hatékonyságot és a prognózis.
Az utóbbi években elég gyakori a módszer fluoreszcens mikroszkóp. Ez alapján a különbség a ragyogás mikroskopiruemogo objektumot az ultraibolya vagy rövid hullámhosszú látható fény spektrumát. Ennek alapján a módszer a differenciálódása Mycobacterium tuberculosis az a képesség, ezen baktériumoknak érzékelni lipid fluoreszcens festékek, majd a fény besugárzás ultraibolya sugarakkal. Attól függően, hogy használt színezékek Mycobacterium tuberculosis, így átlátszó fényes vörös izzás egy zöld háttér és aranysárga - egy sötét zöld háttér. Ez a módszer is használható, hogy vizsgálja bármilyen anyagból, a vizeletben, amely lehet szaprofitákkal nehéz különbséget, míg az ilyen festés. Az utóbbi egy zöld vagy narancs árnyalatú. A legelterjedtebb módszer a színezés akridinnaranccsal által Adamczyk és auramin-rodamin festéssel.