sejtkárosító hatása
Sejtkárosító hatását értékelik mikroszkópos sejttenyészetekben. Mértéke szerint sejtkárosodás izoláljuk vírusok magas vagy közepes citopátiás. Szorzás-beállított vírusok sejttenyészetekben kíséri károsodott morfológiájú egyrétegű sejtekhez. Egyes vírusok okoznak jellemző sejtkárosító változásokat (amennyiben kliniches Coy kórképét) lehetővé teszi, hogy gyorsan, hogy egy előzetes diagnózist. Például, reprodukciós paramixovírust (kanyaró vírus, mumpsz, PC-vírus) kíséri a megjelenése-em jellemző többmagvú óriássejtek; Az adenovírusok kialakulását okozza Skopje betétek nagy, kerek sejtek, és a reprodukciós sejtek herpeszvírus kerek diffúzan található szerte az egyrétegű.
Lepedéket. „A plakkok” nevezik negatív telepek - parcellák roncsolt sejtek, amelyek mintha megvilágítás területe a sejtmonoréteget borított egy réteg agar. Egyes esetekben, a dózis és a citopatogén vírusból kifejezve plakk-képző miolo - Zach (PFU).
Zárványtesteket. Sok vírus okoz fertőzött megjelenő sejtek jellegzetes képződmények - felhalmozódása vírusfehérjék vagy részecskék, amelyek látható a fénymikroszkóp. Zárványtesteket lehet található a citoplazmában (Guarneri borjúra himlő) és a sejtmagban (adenovírusok).
Az a tény, CPE. Egyes vírusok (pl rubeola vírus) nem mutatnak sejtkárosító hatását. Ezek alapján lehet azonosítani a beavatkozás egy másik vírus ismert, hogy a degeneráció a fertőzött sejteket.
Jelenség gemadsorbtsii. Sok vírus fertőzött sejteket képessé megkötni a felületen különböző vörösvérsejteket. A jelenség gemadsorbtsii közös mechanizmusok hemagglutinációban és nyilvánul meg a korai szakaszban, beállta előtt a sejtkárosító hatás az első, az ő hiánya, illetve gyenge kifejezése.
"Color reakció". A táptalaj használható, hogy fenntartsák a sejtek, VNO-FNF indikátor. A sejtnövekedést kíséri felhalmozódása metabolitjai, a váltás a pH és a színváltozás jelzi. A fertőzés kultúrák erősen gátolja a sejt tabolizm me-és közepes megtartja eredeti színét.
Rapid diagnózist. A gyors azonosítását vírusfertőzés kifejlesztette a set-gochislennye módszerek gyors diagnózis kimutatásán alapuló virális Ag. Például, a HIV ranneydiagnostiki széles körben használt ELISA, amely észleli a felületes Ar vírus.
Mennyiségi meghatározása vírusok végzik kétféleképpen - a Study of Infectious és mennyiségi vírusos Ag. Meghatározása titer fertőző vírus nagymértékben függ a kvantitatív kutatás; y bakteriofág részecske fertőzőképesség arány körülbelül 1 (azaz mindegyik vírus részecske képes fertőzést okozni), ez az arány 1:10 (néha magasabb intézkedés miatt virusingibiruyuschego rezisztencia faktorok) az állati vírusok.
Egyes fertőző vírusok. A leginkább hozzáférhető formában a mennyiségi meghatározás - megszámoljuk a vírus „plakkok”. Közvetlen tesztek fertőzőképesség-oldott alkalmazásával létrehozni egy fertőző dózis (ID), vagy egy halálos dózis (LD) a vírus a vizsgált (általában kifejezve lg). ID50 - hígítás 50% -át megfertőzi sejtek; LD50 - hígítás, amely 50% -át elpusztítja az érintett sejteket vagy állatokat.
Kimutatása vírusrészecskék és virális Ag. A leggyakoribb módszer - kvantitatív hemagglutinációs reakciót. A módszer azon alapul, hogy az a vírus-vatsya szorbeált felületén a vörösvérsejtek az állatok és emberek. Mennyiségi elektronikus mikro-ROSCOP használt számlálására az összes vírus (de nem fertőző) részecskék a vizsgálati tárgy (például egy tenyésztő folyadékban).
A tanulmány a morfológiája vírus csak akkor lehetséges a segítségével elektronmikroszkóppal egy-gyakran, ez a módszer nem áll rendelkezésre hiánya miatt egy ilyen drága és bonyolult szerkezet. Sőt, számos kórokozó morfológiailag hasonlóak, ami csökkenti az értékét ezzel a módszerrel. A legelterjedtebb módszer a mikroszkópos vezikulum tartalmának és szöveti kivonatok színezék-munkák (negatív kontraszt), majd megszámlálásával RHK vagy DNS-tartalmú vírusok. Elektronmikroszkópos lehetővé teszi, hogy gyorsan megtalálja a orto- és paramixovírusokkal a mentesítési a légúti, herpeszvírusok egy folyékony hordozók és rotavírusokat a széklettel.
Szerológiai azonosítási módszerek
A legtöbb vírusos fertőzések fejleszteni immunreakciók használt diagnózist. Cellular reakciót rendszerint értékeljük limfocita citotoxicitási tesztek a fertőző ágensek elleni, vagy azok a fertőzött célsejtek vagy meghatározott lities spo-limfociták reagálnak a különböző mitogének és Ar. A gyakorlati Laboratories-ry expresszióját celluláris reakciókat ritkán meghatározva. Gyakoribb talált met-ODS azonosításának antivirális AT.
PH alapul elnyomása sejtkárosító hatása a vírus összekeverés után specifikus AT. Ismeretlen vírus keverhetők ismert kereskedelmi antiszérummal Alkalmas inkubálás után, és vezetjük be a sejt monoréteg. A hiánya sejthalál jelzi eltérést egy fertőző ágens és az ismert AT.
Hemagglutináció gátlás. HIT azonosítja a vírust, ahogy kormányzati agglutinálják különböző vörösvértestek. Ahhoz, hogy ez a kultúra tápközeget kevertünk össze, CO-tartja a gerjesztő, ismert kereskedelmi antiszérummal, és hozzájárul a sejttenyészethez. Az inkubáció után, a képesség a kultúra hemagglutinációban, és annak hiánya teszi a következtetést nem felelés a vírus antiszérummal.
Gátlása sejtkárosító hatása a beavatkozást a vírusok. A reakció tórusz hogy képes tulajdonítható citopatikus hatást az interferenciát a használt vírus azonosítható fut-katsii patogén, zavarja a híres CPE vírus tenyészetben CHUV-ség a sejtek. Ebből a célból a tenyésztőközeget tartalmazó vizsgált virus, így kereskedelmi szérum (például rubeólavírus gyanúja IT), inkubáljuk, és fertőz egy második tenyésztési; 1-2 napig így ismert citopatogén vírus (például bármilyen echovírus). Jelenlétében sejtkárosító hatás következtetni, hogy az első tenyészetet vírussal fertőzött, alkalmazva eleget AT.
Közvetlen immun. Az egyéb vizsgálatok között a legszélesebb körben talált közvetlen immunfluoreszcenciával reakció (a legtöbb gyors, érzékeny és reprodukálható) .Naprimer, azonosítása CMV citopátiás hatás esetén legalább 2-3 hét, és a használata jelölt monoklonális AT azonosítása után lehetséges 24 óra. Adott egy sor ilyen reagensek , ezek alkalmazhatók tenyészetben fertőzött a vírussal, inkubáljuk, mossuk és reagens nem köti megvizsgálni fluoreszcens mikroszkóppal (in lehetővé teszi, hogy azonosítsuk azokat az a fluoreszcencia jelenlétét a fertőzött Klet k).