Extraction fehérje 1
A modern módszerek őrlés szövetet általában együtt egyidejű kinyerésére a fehérjék homogenizátumaiból szövetek. A legtöbb szövetben a fehérjék jól oldódik 8-10% sót megoldásokat. A kitermelés a fehérjék széles körben alkalmazzák különböző pufferelés a keveréket bizonyos pH-értékek, szerves oldószerek, és a nemionos detergensek - anyagok, amelyek elpusztítják a kölcsönhatás a hidrofób fehérjék és lipidek és a fehérje molekulák.
Közül a szerves vegyületek, amellett, hogy hosszú a használt vizes oldatok a glicerin széles körben használják (különösen a szolubilizálás) gyenge szacharóz oldatok. Oldhatóság A fehérjék extrahálására nagymértékben befolyásolja a pH, így protein-kémiában használnak foszfát, citrát, borát puffer elegy pH-ját a savas vagy enyhén lúgos, amelyek elősegítik oldódását mind, és a stabilizáló fehérjék. Különösen elterjedt Tris puffer-rendszerek, amelyek keveréke 0,2 mólos trisz (hidroxi-metil) -amino-metán (HOCH 2) 3 CNH2 (rövidítve „Tris”) egy 0,1 mólos sósav különböző arányú. Izolálására szérumproteinek módszereinek alkalmazásával etanolos kicsapással (lásd. Cohn-módszer), acetont, butanolt, és ezek kombinációi. Szinte az összes szerves oldószerek könny fehérje-lipid kapcsolatok, hozzájárulva a jobb extrahálás fehérjék.
A fehérjék biológiai anyagot egy tiszta, homogén, tudja használni a különböző tisztítószerek Támogatott lehasadócsoportok fehérje-lipid komplexek és törés fehérje-fehérje kötések. Különösen, a felszabadulás a fehérjék (enzimek), de erősen kötünk biomembránokban mitokondriumba vagy más szubcelluláris struktúrák használnak Triton X-100, nátrium-dodecil-szulfát és nátrium-dezoxikolát.
Ábra. 1.1. Laboratóriumi berendezés.
és - termős kézi homogenizátorral 1 - mozsártörő 2 - 3 test - motor, 4 - állvány; mechanikus homogenizátorban (b) és golyósmalomban (a): 1 - ház motor és az aktiváló szerkezet 2 - kamrában zúzás anyag.
Meg kell azonban jegyezni, hogy a tisztítószereket szakadás fellépte fehérje-fehérje kötések, elpusztítani oligomer (kvaterner) fehérjék szerkezete.