A hibridizáció szomatikus sejtek
A szerepe az izolált protoplasztok tenyésztés. Szomatikus hibridizáció protoplaszt-fúzióval kletokosuschestvlyaetsya izoláljuk a szomatikus sejtek a növények, és a létrehozásához használt új genotípusok új formáinak a növények. Az izolált protoplasztok megoldani sok elméleti és gyakorlati problémákat. Ezeket fel lehet használni, hogy végezzen kiválasztás sejtszinten, hogy a munka egy kis térfogatú, nagy számú egyedi sejtek végre közvetlen átadását gének tanulmányozása membrán osztja plasztiszokban.
A protoplasztokat biztosan részt vesznek a szomatikus hibridizáció. A „szomatikus hibridizáció”, vagyis azt a folyamatot a protoplasztok szomatikus sejtek vezették George. Melhersom 1974.
A szomatikus hibridizáció fontos jellemzői. Először. ez a folyamat áll rendelkezésre szinte minden kereszteződésének. Másodszor x, protoplasztfúzióval hozzájárul egyesítésének citoplazmatikus gének a szülő sejtek, amelyek nem történik meg az átkelés ivarsejtek.
Spontán protoplasztfúzióval nem fordul elő, ezért a tudósok, miután sok kutatás egy olyan mechanizmust, ennek a folyamatnak. Azt találtuk, hogy protoplasztokat negatív felületi töltéssel, ami a kölcsönös taszítás. Mert fúziója a tanult, hogy megoldja ezt a taszítás speciális technikák, amelyek hozzájárulnak a eltávolítása membrán felületi töltését. Első mesterséges protoplaszt fúzió segítségével az induktor egyesülés (fyuzogena) végeztük 1970 E. Kokking. Jelenleg olyan hatékony fyuzogenov polietilén-glikol (PEG) és oldatok pH-ja 9-11 és a magas koncentráció mellett a kalciumionok. A mechanizmus a fúziós a protoplasztok PEG a magas koncentrációban ez az anyag (20-30%), ami segít elnyelni minden szabad víz között, a protoplasztok, így azok egyesítése eredményeként kiszáradás. Továbbá, szabad vízfelvétel képződését indukálja pórusok a membránban, amelyeken keresztül áramlik intracelluláris tartalmát. membránkárosodás reverzibilis, így fuzionált protoplasztok regenerálják a sejtfalakat (ábra. 4.1). Továbbá van egy fizikai tényező aktiváló hatása membrán - az impulzusok a villamos áram, ami szintén okoz a protoplasztokat egyesíteni. Feldolgozása elektromos impulzusok, mint a PEG kezelés vezet reverzibilis károsodása a membránokat. AC alkalmazása okoz dielektroforetikus, és protoplasztok található az elektródok között van elrendezve egy sorban egymás mellett azok poláris felületekhez. DC impulzus képződéséhez vezet a pórusok, amelyeken keresztül egy egyesítést (ábra. 4.2).
Amikor szomatikus hibridizáció kétféle sejtek fejlődnek: hibridek és cybrids.
Ábra. 4.1.Sliyanie protoplasztokat az intézkedés alapján polietilénglikol
1 - izolált protoplasztok; 2 - protoplasztfúzióval eredményeként kiszáradás; 3 - a pórusok képződését a membrán a protoplaszt; 4 - folyni pórusain keresztül intracelluláris anyag; 5 - Hybrid protoplaszt
Ábra. 4.2.Sliyanie protoplaszt elektromos áram
1 - izolált protoplasztok; 2 - protoplaszt fúzió poláros felületek; 3 - a kialakulását pórusok membránok befolyása alatt egy erős impulzus egyenáramú; 4 - összekeverjük a citoplazmában; 5 - kialakulását a hibrid protoplasztok
A formáció a hibridek egyesíti mind a nukleáris sejt genomjába. Cybrid cella citoplazmájában mindkét partner, és a kernel - egy. Ez az eredmény érhető el a lebomlását egyik magok után egyesülés vagy ha az egyik a protoplasztok kisztrippeljük mag.
Az első nem-szexuális hibrid a magasabb rendű növények kaptunk 1972 a torkolatánál izolált protoplasztok kétféle dohány: Nicotiana glauca és Nicotiana langsdorfii. Jelenleg kaptunk sok interspecifikus hibridek és mezhsemeystvennyh, akik közül sokan nem tekinthető normális növényeket, és néhány hibridek (Arabidopsis hibrid és fehérrépa) a növények - szörnyek. Feltörekvő anomália - az eredmény a kromoszomális egyensúlytalanság. Leírunk esetekben hibridek közötti protoplasztok patkány eritrociták és élesztősejtek, és az emberi sárgarépa stb
Minden kutatásnak, bármilyen manipuláció az új genotípusok kell gondosan és alaposan átgondolt, és a tudósok tisztában kell lenniük a felelősség és a tudományos etika. Columbia University professzora E. Chargaff arra figyelmeztetett, hogy „ezer kísérletek, valószínűleg semmi nem fog történni, de aztán az egyik esetben néhány történne valami nagyon kellemetlen.” Ő volt a „győződve arról, hogy ez egy kísérlet, hogy konvertálni vagy túljárjon természet egyszer fogja eredményezni, hogy a halál.”
Kapott embrió in vitro. Fagyasztás. embrió transzfer